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1、亚历山大·谢尔盖耶维奇·普希金（Александр Сергеевич Пушкин），1799年6月6日/俄历5月26日)出生于沙俄莫斯科，1837年1月29日逝世于圣彼得堡，是俄国著名的文学家、伟大的诗人、小说家，及现代俄国文学的创始人。19世纪俄国浪漫主义文学主要代表，同时也是现实主义文学的奠基人，现代标准俄语的创始人，被誉为“俄国文学之父”、“俄国诗歌的太阳”(高尔基)。
2、 尼古莱·瓦西里耶维奇·果戈理。1809年4月1日—1852年3月4日）是俄罗斯作家，善于描绘生活，将现实和幻想结合，具有讽刺性的幽默，他最著名的作品是《死魂灵》（或译：《死灵魂》）和《钦差大臣》。
3、费奥多尔·米哈伊洛维奇·陀思妥耶夫斯基，文学家，19世纪群星灿烂的俄国文坛上一颗耀眼的明星，与列夫·托尔斯泰、屠格涅夫等人齐名，是俄国文学的卓越代表。他所走过的是一条极为艰辛、复杂的生活与创作道路，是俄国文学史上最复杂、最矛盾的作家之一。即如有人所说“托尔斯泰代表了俄罗斯文学的广度，陀思妥耶夫斯基则代表了俄罗斯文学的深度”。主要作品有《双重人格》、《女房东》、《白夜》和《脆弱的心》等几篇中篇小说，以及其代表作《罪与罚》。
4、列夫·尼古拉耶维奇·托尔斯泰，俄国作家、思想家，19世纪末20世纪初最伟大的文学家，19世纪俄国伟大的批判现实主义作家，是世界文学史上最杰出的作家之一，他被称颂为具有“最清醒的现实主义”的“天才艺术家”。主要作品有长篇小说《战争与和平》《安娜·卡列尼娜》《复活》等，也创作了大量的童话，是大多数人所崇拜的对象。他的作品描写了俄国革命时的人民的顽强抗争，因此被称为“俄国十月革命的镜子”列宁曾称赞他创作了世界文学中“第一流”的作品。他的作品《七颗钻石》《跳水》《穷人》已被收入人教版和冀教版小学语文书。
5、列林。 生于俄国伏尔加河畔的辛比尔斯克（今乌里扬诺夫斯克），列宁是他的笔名。 著名的马克思主义者、无产阶级革命家、政治家、理论家、布尔什维克党创立者、苏联建立者和第一位***。他发展了马克思主义，形成了列宁主义理论。马克思列宁主义者称他为“全世界无产阶级和劳动人民的伟大导师和领袖”。
6、柴可夫斯基出生于沃特金斯克一个贵族家庭，从小在母亲的教导下学习钢琴，由于父亲的反对，柴可夫斯基进入法学院学习，毕业以后在法院工作。22岁时柴科夫斯基辞职，进入圣彼得堡音乐学院，跟随安东?鲁宾斯坦学习音乐创作，成绩优异。毕业后，在尼可莱?鲁宾斯坦（安东?鲁宾斯坦的弟弟）的邀请下，担任莫斯科音乐学院教授。
7、瓦西里?安德烈耶维奇?茹科夫斯基（ 1783-1852）诗人，翻译家，评论家。出生在图拉省的地主家庭，母亲是被俄国人掳来的土耳其人。茹科夫斯基从小受到良好教育，很早就对文学感兴趣，尝试自己创作剧本。1797年进入莫斯科大学附属贵族寄宿中学，在校期间同时受到古典主义和感伤主义两种流派的影响。
8、格里鲍耶陀夫（1795～1829）俄国剧作家。1795年1月15日 出生于莫斯科一个贵族家庭，1829年2月11日在任驻波斯大使时被杀害于德黑兰。曾就学于莫斯科大学文学系、法学系和数理学系。大学时代结交不少后来成为十二月党人的青年。1825年十二月党人起义失败后，受到株连。1828年出任俄国驻波斯大使，在波斯人对俄国驻德黑兰使馆的袭击事件中丧生。格里鲍耶陀夫的戏剧代表作《智慧的痛苦》（又译《聪明误》）深刻反映了19世纪俄国社会的政治冲突和思想斗争。在塑造具有革命倾向的贵族青年形象恰茨基的同时，也描画了以法穆索夫为首的一群贵族顽固派。恰茨基单枪匹马地与法穆索夫集团进行搏斗，终因势孤力单而败下阵来。同时代的不少俄国人把恰茨基看作是十二月党人的艺术形象。《智慧的痛苦》也有较高的艺术性，除人物性格鲜明外，戏剧台词也十分生动，其中不少成了俄国家喻户晓的成语。格里鲍耶陀夫的剧作 还有《年轻夫妇》、《佯装的不忠实》、《大学生》。
9、 俄国作家。原名亚历山大·亚历山大罗维奇·别斯土舍夫。出身于破落的贵族家庭，曾任军职。1824年参加十二月党人的团体“北社”，属于激进派。曾率领部队参加起义，失败后被判死刑，后改为流放西伯利亚雅库次克服苦役。1829年被遣送高加索当兵，在同山民作战中阵亡。
10、克雷洛夫（1769年2月13日 - 1844年11月21日）是俄国作家,也是世界著名的寓言家、作家，全名是伊万·安德列耶维奇·克雷洛夫(Иван Андреевич Крылов)。著名的作品有：《大炮和风帆》，《剃刀》、《鹰与鸡》等等。 他出生于一个没落的贵族之家，是个贫穷的步兵上尉家庭。他的童年是在特维尔度过的。克雷洛夫除了读书,还经常到集市上去,在这里他学会了意大利文,学会了拉小提琴,学习了绘画。
11、米哈依尔·尤利耶维奇·莱蒙托夫 （1814～1841）俄国诗人。1814年10月15日生于莫斯科一个小贵族家庭，1841年7月21日卒于高加索。3岁丧母，在奔萨省外祖母的庄园度过童年。上中学时开始写诗。1830年考入莫斯科大学，课余写了近300首抒情诗和几首长诗，绝大多数在生前没有发表。1832年因参与反对保守派教授被迫离开大学，转入圣彼得堡近卫军骑兵士官学校，1834年毕业后到近郊骠骑兵团服役。
12、维萨里昂·格里戈里耶维奇·别林斯基（1811—1848）：俄国革命民主主义者、哲学家、文学评论家。别林斯基的贡献是多方面的。他不仅通过他的著作宣传了革命民主主义的政治纲领，而且第一个系统地总结了俄国文学发展的历史，科学地阐述了艺术创作的规律，提出了一系列重要的文学和美学见解，成为俄国文学批评与文学理论的奠基人。他的文学评论与美学思想在俄国文学史上起过巨大的作用，它推动了俄国现实主义文学的进一步发展，对车尔尼雪夫斯基、杜勃罗留波夫美学观念的形成有直接的影响。1848年6月，别林斯基因病去世，年仅37岁。
13、赫尔岑（1812～1870）Herzen，Aleksandr 俄国哲学家，作家，革命家。 1812年4月6日生于莫斯科古老而富裕的官僚贵族雅可夫列夫家，1870年1月21日卒于巴黎。他是私生子，所以不能继承父姓，但他的父亲十分爱他，给他取赫尔岑为姓，德语意为“心”，并使其受到良好的教育。少年时代受十二月党人思想影响，立志走反对沙皇专制制度的道路。1829年秋进莫斯科大学哲学系数理科学习。学习期间，他和朋友奥加辽夫一起组织政治小组，研究社会政治问题，宣传空想社会主义和共和政体思想。
14、尼古拉·加夫里诺维奇·车尔尼雪夫斯基（俄文：Николай Гаврилович Чернышевский ，英文：Nikolay Gavrilovich Chernyshevsky，1828年7月24日～1889年10月29日），俄国革命家、哲学家、作家和批评家，人本主义的代表人物。1828年7月生于萨拉托夫城一个神父家庭。18岁进彼得堡大学文史系。从此经常接近先进知识分子团体彼得拉舍夫斯基小组，潜心研究黑格尔唯心主义哲学和费尔巴哈唯物主义哲学，对法国空想社会主义也产生浓厚的兴趣。1850年大学毕业，次年重返萨拉托夫，在中学教授语文，宣传进步思想
15、魏列萨耶夫 V. V. Veresaev（1867～1945） 俄罗斯著名作家，生于图拉的大家庭，父亲是医生也是社会运动者。自幼即展现优异的语文天赋，十三岁开始写诗。彼得堡大学历史系毕业后攻读医学，此后便一边从事医学，一边继续文学创作。一八九四年发表首篇小说《走投无路》，述说满怀理想的医生深入民间，防疫治病牺牲奉献，却不为民众相信，反被当作传播瘟疫的巫师，毒打至死。魏列萨耶夫与劳工及革命份子的密切往来，引起了当局关注，於一九○一年遭医院开除，且勒令两年内不得于彼得堡居留。同年，他依据自身经历写成《医生札记》，再度呈现了医生面对重重社会问题的无助。除了创作，魏列萨耶夫同时潜心文学研究，最卓著的成果莫过于《普希金资料汇编》和《果戈里资料汇编》两部传记资料，《果戈里是怎样写作的》便是在编纂后者的过程中，应邀写成。其他著作有：论析托尔斯泰与陀斯妥耶夫斯基的《Zhivaya Zhizn》，论创作的《作家的条件》，小说《姐妹》等。
16、库普林（1870～1938） 俄国作家。1870年8月26日出生在奔萨省纳罗夫恰特市一小职员家庭。早年丧父，随母迁居莫斯科。1880年进士官学校，军校生活对他的性格产生很大影响。1890年毕业，编入驻波多利斯克省步兵团。这时期他开始创作。1894年退伍，在基辅以写作为职业。1896年曾任顿涅茨矿区工厂职员。1897年在波列西耶边陲地区当过诵经师。1901年迁居彼得堡，次年结识高尔基和知识出版社作家。后写了反映1905年革命的特写《塞瓦斯托波尔事件》。第一次革命失败后，思想趋于消极，同知识出版社断绝往来。对十月革命态度矛盾，既赞美革命中表现出的英雄主义，又担心祖国文化的命运。1919年全家流亡国外，主要在巴黎居住。1937年身患重病，回到祖国，次年病逝于列宁格勒。
17、布宁，全名：伊凡·布宁（1870－1953），俄罗斯作家，诺贝尔文学奖获得者。生于俄国中部波罗涅日市一破落贵族世家。布宁的创作继承了俄国古典文学的现实主义传统，是写作中短篇小说的高手。他的小说不太重视情节与结构的安排，而专注于人物性的刻画和环境气氛的渲染，语言生动和谐，富于节奏感，被高尔基誉为“当代优秀的文体家”。
18、安德列耶夫（1871-1919）著，俄罗斯风格独特的小说家，他的出众才华曾经得到列夫·托尔斯泰、柯罗连科、勃洛克等同时代名家的赞赏。《瓦西里·菲维伊斯基的一生》描写乡村神父菲维伊斯基笃信宗教，一心以为只要不动摇地信仰上帝，奇迹就会出现。为此，他一生都蒙受各种耻辱和苦难，最后只落得家破人亡的悲惨结局。勃洛克回忆自己读了这部小说，“感到震惊，觉得到处都充满不安，灾难已经临近，可怕的事件就要在门口发生……” 鲁迅称安德列耶夫是“绝望厌世的作家”、“其文神秘幽深，自成一家”。
19、绥拉菲莫维奇，1863年1月7日生于顿河州下库尔莫雅尔斯克镇哥萨克军人家庭。1877年因起草反对沙皇的宣言被流放。其间，他开始文学创作活动。1901年第一部短篇小说集出版。1902年参加“星期三”文学社，不久就成了高尔基支持的“知识”丛刊撰稿人。
20、伊凡·谢尔盖耶维奇·屠格涅夫是19世纪俄国有世界声誉的现实主义艺术大师，他的小说不仅迅速及时地反映了当时的俄国社会现实，而且善于通过生动的情节和恰当的言语、行动，通过对大自然情境交融的描述，塑造出许多栩栩如生的人物形象。他的语言简洁、朴质、精确、优美，为俄罗斯语言的规范化作出了重要贡献。
不好意思，我实在是不知道还有哪些人了。
希望我的回答对您有帮助
结球甘蓝细胞学研究是怎样的？
我才不信呢
A Soldier's Brilliant Idea
Mr. Robinson had to travel somewhere on business, and as he was in a hurry, he decided to go by air. He liked sitting beside a window when he was flying, so when he got on to the plane, he looked for a window seat. He found all of them had already had been taken except for one. There was a soldier sitting in the seat beside this one, and Mr. Robinson was surprised that he had not taken the one by the window; but, anyhow, he at once went towards it.
When he reached it, however, he saw that there was a notice on it. It was written in ink and said, "This seat is preserved for proper load balance, thank you." Mr Robinson had never seen such an unusual notice in a plane before, but he thought that the plane must be carrying something particularly heavy in it, so he walked on and found another empty seat, not beside a window, to sit in.
Two or three people tried to sit in the window seat beside the soldier, but they too read the notice and went on, when the plane was nearly full, a very beautiful girl hurried into the plane. The soldier, who was watching the passengers coming in, quickly took the notice off the seat beside himself and in this way succeededin having the company of the girl during the whole trip.
英语幽默：士兵坐飞机有美女陪伴的高招
由于生意方面的事，罗宾逊先生得出趟门。因为有点紧急，他决定坐飞机。乘机旅行时，他喜欢靠窗坐，故而一登机，他就寻找一个靠窗的座位。他发现只有一个靠窗的座位还空着。在那空座位边坐着一名士兵。令罗宾逊先生纳闷的是，这位士兵没有坐靠窗的位置。罗宾逊先生不管那些，他马上径直朝那个空座位走去。
然而，等到了那儿，他看见座位上有则启事，是用钢笔写的：“为保持装载平衡，特预设该位置，谢谢合作。”罗宾逊先生还从来没有在飞机上见过如此不同寻常的启事。不过，他想飞机上一定装了什么特别重的物品，于是他找了个不靠窗的位置。
又有两三个乘客试图坐在那个士兵旁的靠窗座位上，他们看到那则启事就走开了。当快满座时，一位非常美丽的姑娘匆匆走进机舱。一直在注意进舱旅客的那个士兵赶紧拿掉他旁边空座位上的启事。士兵用这种办法，成功地找到了一位姑娘一路作伴。
2、1、 I have said it a hundred times, we need team work，always seek the best in others. The purpose of this trip , is to train our team in a real situation and to test our new members . Those deserving special praise are the little leaf and four eyes. Although new to the trade, they try hard, they have not only surpass themselves, but even the old guard here。
“说了多少回了,要团结，眼睛要看这别人的长处。这次出来，一是通过实战锻炼队伍,二是考察新人,在这里我特别要表扬的是小叶和四眼。两位虽然刚刚入道，做人啊， 不但突破了自己， 也超越了在座的前辈。
2、This century most expensive commodity is talent.
“21世纪什么最贵？人才！！！
3、An organization without discipline.
“有组织，无纪律。”
4、First my gaze toward the moon, but the moon shines on the ditch.
“我本一心向明月，奈何明月照沟渠”
Who knows me understand my needs, I’m a mystery to he who know me not .
“真是知我者谓我心忧，不知我者谓我何求啊”
5、I can’t stand you armed robber types, no technical skills what so ever.
“我最讨厌你们这些劫匪了，一点技术含量都没有。”
6、I can reliably inform you that, uncle lee is very angry. The consequences will be severe。
“我可以很负责地告诉你，黎叔很生气，后果很严重。。。”
7、I was reckless, I was reckless,never thought that girl would play me。
“大意呀，大意呀，想不到被一丫头片子玩儿了。”
Father's Things
When Tom Howard was seventeen years old he was as tall as his father, so he began to borrow Mr. Howard's clothes when he wanted to go out with his friends in the evening.
Mr. Howard did not like this, and he always got very angry when he found his son wearing any of his things.
One evening when Tom came downstairs to go out, his father stopped him in the hall. He looked at Tom's clothes very carefully.
Then he said angrily, "Isn't that one of my ties, Tom?"
"Yes, Father, it is," answered Tom.
"And that shirt's mine too."
"Yes, that's yours too," answered Tom.
"And you're wearing my belt!" said Mr. Howard.
"Yes, I am, Father," answered Tom. "You don't want your trousers to fall down, do you?"
父亲的东西
汤姆.霍德华十七岁的时候，长得和父亲一样高了，于是当他晚上和朋友一起出去时，就开始借父亲的衣服穿。
霍德华先生可不喜欢这样，当他发现他的儿子穿他的衣服时，总是非常生气。
一天晚上，汤姆下楼准备出去，父亲在门厅里拦住了他。他细细打量着汤姆的穿着。
然后他气呼呼地说：“汤姆，那不是我的一条领带吗？”
汤姆回答说：“是的，父亲，是你的领带。”
“还有那衬衫也是我的。”
“是的，衬衫也是你的。”汤姆回答说。
“还有呢，你连皮带也用我的。”霍德华先生说。
“是的，父亲，”汤姆回答说，“你不愿意让你的裤子掉下来吧？”
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有好多您自己选选吧
A Soldier's Brilliant Idea
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When he reached it, however, he saw that there was a notice on it. It was written in ink and said, "This seat is preserved for proper load balance, thank you." Mr Robinson had never seen such an unusual notice in a plane before, but he thought that the plane must be carrying something particularly heavy in it, so he walked on and found another empty seat, not beside a window, to sit in.
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然而，等到了那儿，他看见座位上有则启事，是用钢笔写的：“为保持装载平衡，特预设该位置，谢谢合作。”罗宾逊先生还从来没有在飞机上见过如此不同寻常的启事。不过，他想飞机上一定装了什么特别重的物品，于是他找了个不靠窗的位置。
又有两三个乘客试图坐在那个士兵旁的靠窗座位上，他们看到那则启事就走开了。当快满座时，一位非常美丽的姑娘匆匆走进机舱。一直在注意进舱旅客的那个士兵赶紧拿掉他旁边空座位上的启事。士兵用这种办法，成功地找到了一位姑娘一路作伴。
2、1、 I have said it a hundred times, we need team work，always seek the best in others. The purpose of this trip , is to train our team in a real situation and to test our new members . Those deserving special praise are the little leaf and four eyes. Although new to the trade, they try hard, they have not only surpass themselves, but even the old guard here。
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4、First my gaze toward the moon, but the moon shines on the ditch.
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Father's Things
When Tom Howard was seventeen years old he was as tall as his father, so he began to borrow Mr. Howard's clothes when he wanted to go out with his friends in the evening.
Mr. Howard did not like this, and he always got very angry when he found his son wearing any of his things.
One evening when Tom came downstairs to go out, his father stopped him in the hall. He looked at Tom's clothes very carefully.
Then he said angrily, "Isn't that one of my ties, Tom?"
"Yes, Father, it is," answered Tom.
"And that shirt's mine too."
"Yes, that's yours too," answered Tom.
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父亲的东西
汤姆.霍德华十七岁的时候，长得和父亲一样高了，于是当他晚上和朋友一起出去时，就开始借父亲的衣服穿。
霍德华先生可不喜欢这样，当他发现他的儿子穿他的衣服时，总是非常生气。
一天晚上，汤姆下楼准备出去，父亲在门厅里拦住了他。他细细打量着汤姆的穿着。
然后他气呼呼地说：“汤姆，那不是我的一条领带吗？”
汤姆回答说：“是的，父亲，是你的领带。”
“还有那衬衫也是我的。”
“是的，衬衫也是你的。”汤姆回答说。
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汤姆.霍德华十七岁的时候，长得和父亲一样高了，于是当他晚上和朋友一起出去时，就开始借父亲的衣服穿。
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“是的，父亲，”汤姆回答说，“你不愿意让你的裤子掉下来吧？”
这篇可以参考，长短适合的：）~~
Ladies and Gentlemen, Good morning! I’m very glad to stand here and give you a short speech.
Man’s life is a process of growing up, actually I’m standing here is a growth. If a person’s life must constituted by various choices, then I grow up along with these choices. Once I hope I can study in a college in future, however that’s passed, as you know I come here, now I wonder what the future holds for me.
When I come to this school, I told to myself: this my near future, all starts here. Following I will learn to become a man, a integrated man, who has a fine body, can take on important task, has independent thought, an open mind, intensive thought, has the ability to judge right and wrong, has a perfect job.
Once my teacher said :” you are not sewing, you are stylist; never forget which you should lay out to people is your thought, not craft.” I will put my personality with my interest and ability into my study, during these process I will combine learning with doing. If I can achieve this “future”, I think that I really grow up. And I deeply believe kindred, good-fellowship and love will perfection and happy in the future.
How to say future? Maybe it’s a nice wish. Lets make up our minds, stick to it and surely well enjoy our life.
中文大意：）~
女士们，先生们，上午好。我很高兴在这里为大家作一个简短的讲话。
人的一生是一个成长的过程，事实上，我现在站在这里也是一次成长。如果一个人的一生必须面临不同的选择，那么我就是伴随着这些选择成长起来的。曾经我盼望将来能上大学，然而那已经过去了，现在我在这儿，只想知道我的未来会是什么样的。
当我来到这所学校，我告诉我自己：我不久的将来都从这里开始。接着我要学习如何做人，如何做一个正直的人，并且拥有一个健康的体魄，能承担重要的任务，能独立思考，思想开放，心思缜密，有判断是非的能力，有一份不错的工作。
我的老师曾经告诉我说：“你不是在修补而是在创造；永远不要忘记你向人们所展示的是你的思想，而不是你的手艺。”我会将我的性格，兴趣爱好和能力一起融入到学习中去。在这过程中，我边学习边实践。如果我能实现这个“未来”，我就认为我真的成长了。并且我深信我的亲人，好朋友以及爱会使我的未来更完美，更幸福。
如何来解释未来呢? 也许那只是一个美好的愿望。让我们下定决心，坚持到底，那我们的人生一定能过得很精彩。
Excuse me.Let me get on.
It's too crowded.
But I must get on!
Who do you think you are?
I'm the driver!
翻译:打扰一下.让我上车.
已经很拥挤了.
但是我必须上去.
你认为你是谁啊?
我是司机!
（一）结球甘蓝细胞形态学研究到目前为止，在对结球甘蓝抗逆、抗病、雄性不育与自交不亲和材料及创新种质资源的细胞形态学方面，国内外都做了一些研究，取得了长足的进展，对于种质资源的利用和创新具有重要的意义。
王丽娟、秦智伟（1995）对甘蓝裂球性的解剖学进行了研究，找出甘蓝易裂球品种和抗裂球品种在叶片结构上的差异。认为抗裂球品种的叶表皮细胞壁比易裂球品种的叶表皮细胞壁厚，因而机械强度大，细胞壁机械强度大可能是抗裂球品种不裂的原因之一。易裂品种球叶的叶肉细胞间隙大，因而吸水力强，使其韧性大大降低，可能是易裂品种叶球易裂的原因之一。此项研究对于探讨甘蓝裂球机理提供了初步的理论依据。
在甘蓝的抗逆性研究中，向珣等（2001）研究了热胁迫下，不同抗热性甘蓝叶片细胞的细胞膜、叶绿体及线粒体结构。结果表明，抗热材料在细胞膜及叶绿体结构上较热敏材料更完整，可作为抗热性鉴定标准之一，材料间在线粒体结构上则未发现有明显差异。Ristic等（1992）也研究认为，热胁迫下，叶绿体结构在材料间出现明显差异，而线粒体结构变化在材料间相似。同时，针对热敏材料本身，线粒体较叶绿体结构更为稳定。
在创新种质资源的细胞学研究中，满红、张成合等（2005）在进行结球甘蓝4x×2x和2x×4x的授粉受精及胚胎发育观察基础上，结合幼胚离体培养技术，成功地获得了结球甘蓝三倍体材料，并对其减数分裂行为、染色体在后期Ⅰ的分离及雌雄配子的传递率进行了观察研究，这为创建结球甘蓝“初级三体系”等珍贵材料及其遗传研究奠定了基础。葛亚明、陈利萍（2006）以榨菜（茎瘤芥）和甘蓝为材料，通过离体靠接法人工合成了两者的种间嵌合体，并分析了其细胞学特性，结果表明：不同类型嵌合体的叶片组织解剖结构不同。该研究为利用该嵌合体进行细胞互作、器官形态发生等基础理论研究提供了良好的试验体系，同时也为榨菜和甘蓝种质资源创新提供了一条新途径。
在甘蓝雄性不育材料的细胞学研究中取得了一些重要进展。刘玉梅（2003）以甘蓝显性雄性不育材料DGMS79-399-3为材料，从细胞形态、亚细胞水平对甘蓝显性细胞核雄性不育机理进行了研究，明确了该不育材料花药败育的时期和主要特征，探明了甘蓝显性细胞核雄性不育在细胞学方面的败育机理，为该不育材料在甘蓝类及其他十字花科作物中更有效、更合理的利用提供了理论基础。首次系统观察比较了甘蓝显性细胞核雄性不育材料中不育株、微量花粉株与可育株花药发育过程中细胞超微结构的变化（图10-17至图10-24）。发现甘蓝显性细胞核雄性不育株花药败育时期最早发生在花粉母细胞早期，败育高峰期在花粉母细胞至小孢子单核期，微量花粉株花药败育时期最早发生在花粉母细胞减数分裂前期，败育高峰在花粉母细胞减数分裂后期至小孢子单核期。从亚细胞水平上明确了甘蓝显性细胞核雄性不育基因表达的特征。与正常可育株相比，甘蓝显性细胞核雄性不育花药发育过程中的败育特征主要是：线粒体、内质网、细胞核、质体、液泡等细胞器结构破坏直至解体；花粉母细胞从发育早期至减数分裂后期，细胞形态和超微结构均出现异常现象，在花粉母细胞发育早期表现细胞壁特厚，细胞核、核仁较小，细胞间胼胝质厚（图10-17、图10-18），不育花药花粉母细胞减数分裂前超微结构细胞核出现异常现象，线粒体等细胞结构开始破坏（图10-19、图10-20）；部分花粉母细胞不能进行正常减数分裂或停止生长发育；绒毡层发育异常，提前解体；四分小孢子外被一层很厚的膜状物包被，四分小孢子不能正常生长发育，四分孢子间胼胝体不能正常分解，四分体不分开（图10-21、图10-22）；成熟不育花粉粒内部线粒体等细胞器及内含物全部降解（图10-23、图10-24），花粉粒成空壳状，花粉壁发育不全，扭曲变形；药壁细胞生长缓慢，其体积大小约为可育药壁的1/2。
图10-17 可育花药花粉母细胞发育早期超微结构
（细胞核大、居中，核仁大）（×3 500）
图10-18 不育花药花粉母细胞发育早期超微结构
（细胞核、核仁较小，细胞间胼胝质厚）（×3 500）
图10-19 可育花药花粉母细胞减数分裂前超微结构
（花粉母细胞内细胞器十分丰富）（×12 000）
图10-20 不育花药花粉母细胞减数分裂前超微结构
（细胞核出现异常现象，线粒体等细胞结构开始破坏）（×12000）
图10-21 可育株四分孢子形态超微结构
四分孢子间有许多胞间连丝，四分孢子间胼胝质基本溶解（×3000）
图10-22 不育株四分孢子形态超微结构
形态异常的四分孢子不分开，四分孢子间及孢子外包被厚厚的胼胝质（×3000）
图10-23 成熟可育花粉粒内部超微结构
线粒体等细胞器丰富（×20000）
图10-24 成熟不育花粉粒内部超微结构
线粒体等细胞器及内含物全部降解（×20000）
刘玉梅（2003）研究并明确了不同育性甘蓝DGMS材料花粉细胞学形态特征。甘蓝显性细胞核雄性不育的花粉经醋酸洋红染色，在光学显微镜下观察，花粉外形为多种不规则形状，花粉染色浅或不被染色，花粉内含物和外壁完全破坏。扫描电镜下，败育花粉形态异常，花粉外壁凹陷、皱缩成毡帽状，多个花粉粘连成莲座状，花粉外壁纹饰不明显或不能形成纹饰，部分畸形花粉的外壁表面为锯齿状或瘤状突起，未发育好的早期花粉成棉花状和花椰菜状细胞团（图10-25）。
图10-25 甘蓝DGMS79-399-3可育与不育花粉形态扫描电镜图
卞春松（1994）研究表明，Ogura甘蓝异源胞质不育系败育在幼嫩小孢子期，黑芥不育异源胞质败育在造孢细胞时期，甘蓝显性核不育材料79-399-3败育主要在四分体期，甘蓝隐性核不育97A败育发生在减数分裂前期。漆红艳等（2006）对500个自交不亲和性甘蓝纯合二倍体花粉母细胞减数分裂各时期染色体行为进行了观察。朱金鑫等（2004）对结球甘蓝花序发育过程中顶端结构的解剖学变化也进行了研究，结果表明，甘蓝顶端亚外套两侧细胞分裂分化形成顶生叶原基，在顶生叶原基内侧的细胞将进行分裂产生花序侧枝原基，进而形成侧生花序枝。
（二）原生质体培养与融合研究
远缘种属之间由于遗传或生理障碍的存在，很难杂交成功，但通过原生质体培养和体细胞融合技术，可克服生殖障碍，实现遗传物质之间的交流。
结球甘蓝原生质体培养自20世纪80年代初期由Lu等（1982）以基因型Greyhound的子叶为材料对游离原生质体进行培养首次获得成功以来，至今已取得了较大的进展。已相继从Market Prize和报春的真叶（Bindney et al.，1983；傅幼英等，1985），Ladi、Ladi×Golden和N101的根（Lillo et al.，1986），秦菜3号的子叶（孙振久，1993），N101和小鸡心的下胚轴（Lillo et al.，1986；钟仲贤等，1994）等外植体为材料的游离原生质体培养中获得了再生植株，为甘蓝在原生质体水平上的遗传转化及种质资源创新打下了基础。
随着甘蓝原生质体培养及植株再生技术的突破，原生质体融合也取得了很大进展。自从Schenck等（1982）首次利用原生质体融合获得Early Spring、Savoy King、Stone Head等结球甘蓝与Tendergreen等白菜体细胞杂种后，各国有关学者对这一技术进行了深入的研究。日本学者Taguchi等（1986）获得了结球甘蓝与白菜叶肉原生质体融合的再生植株。雷开荣等（1999）通过结球甘蓝Toskama与萝卜NeoroRA12984原生质体融合获得了再生植株。
（三）远缘杂交与胚培养研究
通过远缘杂交结合幼胚培养，已获得了白菜与甘蓝、萝卜与甘蓝、甘蓝型油菜与甘蓝的远缘杂种植株。满红、张成合等（2005）在对结球甘蓝4x×2x和2x×4x的授粉受精及胚胎发育观察的基础上，结合幼胚离体培养技术，成功地获得了结球甘蓝三倍体材料。
程雨贵等（2006）用基因组原位杂交方法（Genomicinsituhybridization，GISH）研究了萝卜（Raphanus sativus，2n=18，RR）和甘蓝（Brassica oleracea，2n=18，CC）属间杂种F1减数分裂过程，结果表明杂种体细胞染色体组成为RC，2n=18，但花粉母细胞有3种类型：第一种类型为RC，2n=18，终变期染色体平均配对构型为14.87+1.20+0.04+0.06，染色体配对主要发生在萝卜和甘蓝染色体之间；后期9条萝卜染色体主要以4/5和3/6的分离比移向两极，所形成配子的染色体数目和组成均不平衡，配子败育。第二种类型是RRCC，2n=36，终变期染色体形成18个二价体；后期染色体均衡分离，
形成RC不减数配子。第三种类型是RRCC亚倍体，2n=30～34，少数萝卜染色体丢失，形成的配子具有全套的甘蓝染色体和部分萝卜染色体。
（四）花药、花粉（游离小孢子）培养研究
花粉母细胞经减数分裂之后形成的小孢子，在正常条件下发育成成熟的花粉粒，即配子体发育途径，若在外界胁迫的条件下，就会转向孢子体发育途径，形成小孢子胚，进而发育成单倍体植株（Nitsch and Norreel 1973；Touraev et al.，1997）。这种通过雄核发育诱导单倍体的方法有2种，花药培养和游离小孢子培养。游离小孢子培养的技术是在花药培养技术的基础上发展而来的，但它比花药培养产生的单倍体频率高，而且不受花药壁、花药隔等母体组织的影响，因此，游离小孢子培养有着花药培养不可代替的优点。获得的单倍体植株经过自发或诱发的染色体加倍，成为正常可育纯合二倍体植株。
Keller ＆ Armstrong（1981）首次报道了甘蓝花药培养的成功。但这一技术在实际应用中存在两大问题：一是产生植株的倍性具有不可预测性，二是很多基因型产胚率极低（Lelu and Bollon，1986）。1982年Lichter等成功诱导出甘蓝型油菜游离小孢子胚及再生植株，为甘蓝游离小孢子培养奠定了坚实的基础。自Lichter（1989）和Takahata（1990）最早在结球甘蓝上成功得到了游离小孢子再生植株以来，各国学者对甘蓝游离小孢子培养技术进行了较深入的研究，并已在结球甘蓝上取得了一些进展。对结球甘蓝小孢子培养的研究主要集中在小孢子胚胎发生的影响因素、植株再生及染色体加倍方面。
1.小孢子胚胎发生的影响因素
（1）供体植株的基因型 通过对不同基因型的甘蓝游离小孢子培养的研究表明，供体植株的基因型对小孢子胚胎发生的影响极为重要，它不仅影响产胚率，而且也影响胚的质量（Chuong et al.，1988）。Duijs等（1992）对Bindsachsener-CPRO bra88045和Jersey Queen等15份结球甘蓝品种进行了游离小孢子培养，在其中14份材料中获得了胚，其胚胎产生的频率为0.1%～7.4%。张风兰等（1994）对爱知大晚生、野崎早生等8个结球甘蓝品种进行了游离小孢子培养，结果只有其中4个品种产生了小孢子胚，且胚胎发生的频率均较低，研究表明胚胎发生能力主要受核基因控制，呈部分显性遗传。Kudolf等（1999）通过用出胚率高的基因型（Hawke、R1、R2）与难出胚的基因型（V? dinsko）进行杂交，在其后代获得了较高的出胚率，认为控制胚胎发生的基因存在于高出胚基因型中，并呈现出高度的遗传力。中国农业科学院蔬菜花卉研究所甘蓝组袁素霞等2005年春对5份结球甘蓝材料进行了游离小孢子培养，在每份材料中均获得小孢子胚。其中中甘11的出胚率最高，每个蕾达18.07，中甘8号最低，每个蕾为0.03个。
（2）小孢子培育取样时期 小孢子发育时期一般分为单核期、双核期和三核期，并非任何时期的小孢子都适于培养。小孢子发育时期、花蕾大小、取样位置和取样时期都会影响到小孢子培养效果。一般认为，在单核靠边期为取样适宜时期。但不同基因型有一定的差异。方淑桂等（2005，2006）认为强夏甘蓝在盛花期取材最为适宜，而且只有单核晚期至双核早期的小孢子才能发育成胚状体。汤青林等（2000）认为甘蓝游离小孢子培养取主花序上的花蕾效果较好。Takahata等（1991）曾报道，只要所选取的小孢子的发育时期合适，花序和植株年龄对胚胎发生都没有影响。
（3）预处理 对小孢子进行预处理是利用一种逆境（环境胁迫）来诱导胚胎的形成（Lichter，1982；Touraev et al.，1997）。预处理包括离心、低温、高温、射线、秋水仙素、饥饿等处理。目前在甘蓝上广泛应用的预处理为高温预处理。甘蓝小孢子培养一般在30～35℃下预处理24～48h可明显提高胚状体诱导率。中国农业科学院蔬菜花卉研究所甘蓝组袁素霞等研究表明，32.5℃高温预处理1～2d有利于胚胎的发生，但大多基因型以32.5℃处理1d的效果较好。
（4）培养基及其成分 目前在甘蓝游离小孢子培养中，广泛采用的冲洗基本培养基为B5培养基（Gamborg et al.，1968），最后用来游离小孢子培养的培养基为NLN培养基（Lichter，1982）。培养基的pH值也是诱导小孢子胚胎发生的一个关键因素（Ballie et al.，1992），pH可能充当着一个调节物，它调节小孢子与培养基之间的物质交换（Gland et al.，1988），在甘蓝游离小孢子培养中pH值通常调至5.8。培养基中加蔗糖不仅为小孢子培养提供碳源，而且还调节培养基的渗透压，在甘蓝游离小孢子培养中多采用13%蔗糖的培养基。方淑桂等（2005，2006）先用17%蔗糖浓度的培养液培养强夏的游离小孢子，4d后再添加8%蔗糖浓度的培养液可显著提高其胚产量。在甘蓝游离小孢子的培养过程中加入适量的活性炭（AC）可以加快离体培养进程，提高产胚率，一般认为，甘蓝类小孢子培养宜用0.5～1g/L的活性炭。朱至清等（1978）认为外源激素对花粉细胞去分化启动不是必需的，但它能防止多细胞花粉的败育，使较多细胞形成愈伤组织。田笑明等（1987）认为，初始培养液中加低浓度的激素有利于花粉小孢子启动，而到小孢子第二次有丝分裂间需要提高激素水平，所以小孢子早期分裂时不需要高激素水平，但不加是不利的，因为到了花粉小孢子第二次有丝分裂期间需要提高激素的水平，从而进一步说明在培养早期适时调整激素成分是必要的，可以明显促成多细胞花粉的形成。刘艳玲等（2006）通过对20个基因型的结球甘蓝材料（由北京市农林科学院蔬菜研究中心甘蓝课题组提供，G1-G20）进行游离小孢子培养，结果表明基因型、蔗糖浓度对胚发生能力影响最大，除个别基因型对蔗糖浓度有较高的要求外，蔗糖浓度在13%、激素组合NAA（0.05mg/mL）+BA（0.1mg/mL）的培养基适合较多基因型的小孢子胚发生，在培养基中添加适量活性炭能明显地提高出胚率。袁素霞等研究结果表明，加入6-BA并不是对所有基因型都有促进作用，如，0.05mg/L 6-BA对8398有时起促进作用，而0～0.2mg/L 6-BA对中甘11具有抑制作用。培养温度和光照对甘蓝小孢子胚发生影响很大，甘蓝以32.5℃暗培养1～2d，然后再转入25℃条件下继续暗培养2～3周直至形成子叶形胚为宜。
2.小孢子植株再生和染色体加倍
胚的直接成苗率与培养基、胚的质量以及供体植株的基因型都有关。在甘蓝上最常用的方法是，把胚直接接在不含任何激素的B5固体培养基（2%的蔗糖）或MS培养基上，25℃、16h的光照条件下培养3～4周即可发育成小植株。Hansen等（2000）曾报道，先用5mg/L ABA处理胚1h，然后再干燥处理12～90d，可使胚的萌发率达到100%，这一方法已经在甘蓝上得以应用。
小孢子培养得到的单倍体植株，通常表现为高度不育，为了能使之正常结籽，与育种实践相结合，必须诱导染色体加倍。染色体加倍的方式有两种，一是发生在游离小孢子培养时期，二是对成苗的小孢子后代植株进行人工加倍。Kasha（2005）报道，自然加倍与预处理有关，预处理可能会造成均等分裂后细胞壁形成的失败，从而导致核的融合。此外，还与预处理时的小孢子发育时期有关，单核期的小孢子可能产生较高频率的双单倍体，双核早期的小孢子可能会导致产生更多的三倍体或其他水平的多倍体。Rudolf等（1999）报道，在小孢子培养中加入反细胞分裂剂，可提高自然加倍率。Kudolf等（1999）还对小孢子植株再生及再生群体的染色体加倍进行了研究，结果表明，通过ABA干燥处理小孢子胚可以提高胚再生植株的频率，利用抗微管形成的化学物质对游离小孢子处理可以提高再生群体的自然加倍率。杨丽梅等（2003）研究表明，通过小孢子培养获得的组培苗大部分在培养过程中可自然加倍成双单倍体植株，她们从8398中获得的5个胚的组培苗，其中有4个胚（胚1、2、4、5）的组培苗全部自然加倍，而来源于第3个胚的9株组培苗中，有2株未加倍，总自然加倍率达84.6%。袁素霞等（2007）研究结果显示，小孢子后代群体的加倍率因基因型而异，如中甘11在获得的245个胚再生植株中，有176个发生了自然加倍，加倍率为71.84%；而8398在获得的393个胚中，只有188个发生了自然加倍，加倍率为47.84%。
好了，今天关于“新特aev”的话题就讲到这里了。希望大家能够对“新特aev”有更深入的认识，并且从我的回答中得到一些帮助。